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離心機常用的離心方法:
1.差速離心法:采用不同的離心速度和離心時(shí)間,使沉降速度不同的顆粒分步離心的方法,稱(chēng)為差速離心。操作時(shí),將含有兩種不同顆粒的混懸液,以常速離心,使大的顆粒下沉,將上清液傾倒于另一離心管中,再加大離心力,離心一定時(shí)間,分離小的顆粒,反復多次分離,達到分離目的。差速離心主要用于分離大小和密度差異較大的顆粒。差速離心法的優(yōu)點(diǎn)是:操作簡(jiǎn)單,離心后用傾倒法即可將上清液與沉淀分開(kāi),并可使用容量較大的角式轉子。
2.密度梯度離心法:該法又分為速率區帶離心法和等密度區帶離心法。樣品在一定惰性梯度介質(zhì)中進(jìn)行離心沉淀或沉降平衡,在一定離心力下把顆粒分配到梯度液中某些特定位置上,形成不同區帶的分離方法。該法的優(yōu)點(diǎn)是:具有很好的分辨率,分離效果好,可一次獲得較純顆粒;適用范圍廣,既能分離沉淀系數差的顆粒,又能分離有一定浮力密度的顆粒;顆粒不會(huì )積壓變形,能保持顆?;钚?,并防止已形成的區帶由于對流而引起混合。被離心的物質(zhì)根據其沉降系數不同進(jìn)行分離,同類(lèi)物質(zhì)則因分子大的沉降速度快于分子小的物質(zhì)從而得到分離。密度梯度的制備可采用梯混合器,也可將不同濃度的蔗糖溶液,小心地一層層加入離心管中,越靠管底,濃度越高,形成階梯梯度。在密度梯度離心過(guò)程中,區帶的位置和寬度隨離心時(shí)間的不同而改變。隨離心時(shí)間的加長(cháng),區帶會(huì )因顆粒擴散而越來(lái)越寬。
3.分析性超速離心法:分析型超速離心機主要由一個(gè)橢圓形的轉子、一套真空系統和一套光學(xué)系統所組成。該轉子通過(guò)一個(gè)柔性的軸連接成一個(gè)高速的驅動(dòng)裝置,此軸可使轉子在旋轉時(shí)形成自己的軸。轉子在一個(gè)冷凍的真空腔中旋轉,其容納兩個(gè)小室:分析室和配衡室。分析室的容量一般為1mL,呈扇形排列在轉子中,其工作原理與一個(gè)普通水平轉子相同。分析室有上下兩個(gè)平面的石英窗,離心機中裝有的光學(xué)系統可保證在整個(gè)離心期間都能觀(guān)察小室中正在沉降的物質(zhì),可以通過(guò)對紫外光的吸收或折射率的不同對沉降物進(jìn)行監測。
上一條:醫用離心機校準的方法
下一條:低速離心機的安裝要求: