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酶標儀測量波長(cháng)的設定以什么為標準
酶標儀即酶聯(lián)免疫檢測儀。是酶聯(lián)免疫吸附試驗的專(zhuān)用儀器又稱(chēng)微孔板檢測器??珊?jiǎn)單地分為半自動(dòng)和全自動(dòng)兩大類(lèi),但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個(gè)比色計,即用比色法來(lái)進(jìn)行分析。 測定一般要求測試液的最終體積在250μL以下,用一般光電比色計無(wú)法完成測試,因此對酶標儀中的光電比色計有特殊要求。
實(shí)驗中波長(cháng)的選擇主要依賴(lài)于你要測的樣品。樣品在不同的波長(cháng)下,對光的吸收值也不同,但都有一個(gè)吸收峰,一般選擇吸收峰時(shí)的波長(cháng)進(jìn)行實(shí)驗。比如同樣是MTT法做細胞毒性實(shí)驗,就有使用490nm和570nm兩種波長(cháng)選擇,如果使用了DMSO作為試劑,在溶解后呈紫(紅)色,在490nm有最大吸收值;而對于SDS和酸化異丙醇,則選用570nm(655nm作為參考波長(cháng))。
酶標儀波長(cháng)設定還要看你用的是什么酶標儀,如果是光柵式單色器(可以1nm步進(jìn)調節),就可以直接設定吸收峰的波長(cháng);如果是濾光片式單色器,因為受濾光片波長(cháng)限制,有時(shí)你就需要選接近使用波長(cháng)的濾光片,比如655nm,你就可能選用650nm的濾光片。
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