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酶標儀的工作原理
使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質(zhì)分開(kāi),zui后結合在固相載體上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據顏色反應的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高,故可極大地放大反應效果,從而使測定方法達到很高的敏感度。
光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過(guò)濾光片或單色器變成一束單色光,進(jìn)入塑料微孔極中的待測標本.該單色光一部分被標本吸收,另一部分則透過(guò)標本照射到光電檢測器上,光電檢測器將這一待測標本不同而強弱不同的光信號轉換成相應的電信號.電信號經(jīng)前置放大,對數放大,模數轉換等信號處理后送入微處理器進(jìn)行數據處理和計算,zui后由顯示器和打印機顯示結果. 微處理機還通過(guò)控制電路控制機械驅動(dòng)機構X方向和Y方向的運動(dòng)來(lái)移動(dòng)微孔板,從而實(shí)現自動(dòng)進(jìn)樣檢測過(guò)程.而另一些酶標儀則是采用手工移動(dòng)微孔板進(jìn)行檢測,因此省去了X,Y方向的機械驅動(dòng)機構和控制電路,從而使儀器更小巧,結構也更簡(jiǎn)單.
微孔板是一種經(jīng)事先包理于放置待測樣本的透明塑料板,板上有多排大小均勻一致的小孔,孔內都包埋著(zhù)相應的抗原或抗體,微孔板上每個(gè)小孔可盛放零點(diǎn)幾毫升的溶液.
光是電磁波,波長(cháng)100nm~400nm稱(chēng)為紫外光,400nm~780nm之間的光可被人眼觀(guān)察到,大于780nm稱(chēng)為紅外光。人們之所以能夠看到色彩,是因為光照射到物體上被物體反射回來(lái)。綠色植物之所以是綠色,是因為植物吸收的大部分為紅橙光和藍紫光,但對綠色不吸收,反射出來(lái),所以植物呈現為綠色。酶標儀測定的原理是在特定波長(cháng)下,檢測被測物的吸光值。
隨著(zhù)檢測方式的發(fā)展,擁有多種檢測模式的單體臺式酶標儀叫做多功能酶標儀,可檢測吸光度(Abs)、熒光強度(FI)、時(shí)間分辨熒光(TRF)、熒光偏振(FP)、和化學(xué)發(fā)光(Lum)。
酶標儀從原理上可以分為光柵型酶標儀和濾光片型酶標儀。光柵型酶標儀可以截取光源波長(cháng)范圍內的任意波長(cháng),而濾光片型酶標儀則根據選配的濾光片,只能截取特定波長(cháng)進(jìn)行檢測。
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