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紫外分光光度計是一種常用的光度計產(chǎn)品,可以在紫外可見(jiàn)光區任意選擇不同波長(cháng)的光,具有性能穩定、使用靈活、可靠性高、維護簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn)。紫外分光光度計在使用時(shí)需要進(jìn)行校正,下面小編就來(lái)具體介紹一下紫外分光光度計校正方法,希望可以幫助到大家。
紫外分光光度計的校正方法
紫外分光光度計的校正方法:分光光度法的zui重要的一個(gè)物理化學(xué)量是吸光度。為了獲得準確的研究結果,準確測得樣品溶液的吸光度是非常重要的。一般,分析結果的不可靠性與偶然誤差和系統誤差有關(guān)。偶然誤差影響測量的精密度,可通過(guò)足夠數量測量的統計處理來(lái)減少;系統誤差影響測量結果的準確度,可在大體相同實(shí)驗條件下,用比較一種物質(zhì)的準確測量結果,使系統誤差統一起來(lái)。而分光光度計的系統誤差(波長(cháng)校正、分光光度計的慢散光、放大器的線(xiàn)性響應、暗電流和比色皿的光程)和操作誤差(溫度改變、儀器讀數、操作者的改變、使用物質(zhì)的純度、稱(chēng)量和濃度、pH)對測量吸光度的影響是可以檢查和校正的。關(guān)于操作誤差,多數情況下,通過(guò)嚴格按操作程序測量、儀器調零、準確稱(chēng)量等來(lái)控制或減少這種誤差的產(chǎn)生。關(guān)于儀器的系統誤差,可通過(guò)對分光光度計的定期校正來(lái)克服,若所需準確度很高的測量,則必須天天校正。
校正內容:
1、波長(cháng)的準確度試驗 以?xún)x器顯示的波長(cháng)數值與單色光的實(shí)際波長(cháng)值之間誤差表示,應在±1.0nm范圍內??捎脙x器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線(xiàn)進(jìn)行校正;
2、吸收度的準確度試驗;
3、雜散光的試驗;
4、波長(cháng)重現性試驗;
5、分辨率試驗。
吸光度的校正方法:校正吸光度常用一很純物質(zhì)一定濃度的溶液為標準,且此溶液的吸光度系數經(jīng)不同實(shí)驗室核對,為了使標準液吸光度不受測定波長(cháng)的微移動(dòng)而有改變,常選擇具有較平滑吸收高峰的物質(zhì),同時(shí)要求溶液穩定,且在相當的波長(cháng)范圍內吸收度的改變符合Beer-Lambert定律,常用硫酸銅、硫酸銨鈷和硝酸鈉或鉀的溶液。鉻酸鉀溶液是zui常用的標準溶液,此溶液在紫外區和可見(jiàn)區均適用。
波長(cháng)或波數的校正方法:可用具有窄吸收帶的溶液,濾光片或蒸氣來(lái)校正所需要的光波范圍。如果要求很高的精密度時(shí),可用放電燈泡發(fā)射的射線(xiàn)來(lái)校正。有的光譜儀其上已裝有一個(gè)為校正用的燈。苯的蒸氣對校正一定范圍的波長(cháng)亦很有用,可用一小滴苯放于一厘米厚的吸收杯中,測其吸收波長(cháng),在遠紫外區可用氧氣的吸收帶進(jìn)行校正。用各種稀土金屬的濾光片,可以很快地校正波長(cháng),但準確度不如上述方法高。常用含有鈥和釹、鐠離子的濾光片。
雜散光的校正方法:小量的雜散光往往會(huì )引起較大的測量誤差,它的校正可用一個(gè)能*吸收某一波長(cháng)單色光,且在其他波長(cháng)吸收很弱的溶液。從這個(gè)溶液所表現的透光情況可推測雜散光的近似值。由雜散光帶來(lái)的偽吸收帶,亦可用Beer-Lambert定律來(lái)檢查,但用此定律檢查偽吸收帶誤差較大。由切斷范圍之外所表現的透射比可得出近似的雜散光百分數。若所含雜散光大于0.1%,應設法減低,或對測得的吸收光度進(jìn)行校正。由雜散光引起的誤差與雜散輻射成正比,因此校正值很容易從化合物的近于正確的曲線(xiàn)計算而得。此外,還可用一個(gè)適當的濾光片,該濾光片在測定波長(cháng)范圍內*透光,但吸收此范圍外的光波,由此來(lái)消除雜散光。
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